纯氟油Fluo-Oil 135(氟油3M Novec HFE7500电子氟化液的替代品)

Fluo-Oil 135（简称（chēng）FO135） 是一种纯氟化油（yóu），可用于替换氟（fú）油3M Novec HFE7500电子（zǐ）氟化液。 Fluo-Oil 135氟油的（de）化学和（hé）物理化学性质与3M Novec HFE7500 相似，如下表所（suǒ）示:

优势

生物（wù）相（xiàng）容性、可重复性和稳定性。

如何使用？

氟油（yóu）Fluo-Oil 135用于稀释FluoSurf Neat表面（miàn）活性剂或已经用Fluo-Oil 135油稀释（shì）的（de）表面活（huó）性（xìng）剂。

（由于FluoSurf Neat表面（miàn）活性剂是一种PFPE-PEG结构的复（fù）杂高效（xiào）纯表面（miàn）活性剂（jì），因为类似于PFPE-PEG结构（gòu）的纯表面活性剂如FluoSurf Neat，Surf-Drop，PFPE-PEG-PFPE两嵌段或（huò）三嵌段表面活性剂，Surf 含氟表面活性剂等，基本（běn）上都可以使用（yòng）纯氟（fú）油Fluo-Oil 135进行稀释。稀释（shì）的浓度从0.2%到12%之间（jiān）。）

保存

室温下（xià）避光保存（cún）

安全注意事（shì）项

● 避免吸（xī）入、摄入和接触皮肤和眼（yǎn）睛

● 穿戴耐（nài）化学腐（fǔ）蚀的个（gè）人防护装备

● 戴（dài）上合适（shì）的手套

● 穿合适的防（fáng）护（hù）服

● 戴侧护罩（zhào）的安全（quán）眼（yǎn）镜

与3M HFE7500油（yóu）产生液滴（dī）性能的测试比（bǐ）较

分别（bié）用3M HFE7500和Fluo-Oil 135氟化油稀释FluoSurf neat表面活性剂，得到4w/w%的质量浓度。

水滴产生或油包水液滴产生的两相流速：

油相流速为（wéi）300μL/hr，水相流速为100μL/hr。

水相为PBS溶液或（huò）100μM荧光素的（de）PBS溶液（用于测（cè）试液滴的泄（xiè）露）

倒置显微镜观察和（hé）Image J软件分析。

一、液（yè）滴尺寸及其分（fèn）布

在Fluo-Oil 135和（hé）HFE7500油中，产生（shēng）相似尺寸的水滴。在既定流速参数下，液滴（dī）的平均（jun1）直径为110μm。液（yè）滴尺寸的（de）CV分别为2.3%（Fluo-Oil 135油）和2.9%（HFE7500油）。

二（èr）、液滴稳定性

大多数研究团队使用液滴微流（liú）体进行（háng）细胞封装或 PCR 应用。 因（yīn）此，需要通过 PCR 的加热循环以及（jí）在 37°C 下长期（qī）孵育来产生（shēng）稳定的液（yè）滴。 表面（miàn）活性剂的（de）选择至关重（chóng）要（yào），但（dàn）选择油（yóu）同样重要，以确保可重复的实验以及（jí）单分散液（yè）滴群的生成和保存。

分（fèn）别从（cóng）三（sān）个方面测试液滴的稳定性（xìng）：一是把液（yè）滴重（chóng）新注入到玻璃观察腔室（shì）内；二是经典的PCR热（rè）循环过程，循环过程（chéng）30次，每次热循环为（wéi）98°C运行10s, 50°C运行5s, 72°C运（yùn）行10s；三是置（zhì）于37℃的（de）培养箱内放置（zhì）3天。对1万个液滴进行分析。

无论是在 Novec™ HFE 7500 还是（shì） Fluo-Oil™ 135 中形成 FluoSurf™ 稳定（dìng）的（de）液滴，在 PCR 加热循环后或在 37°C 孵育 3 天后，液滴平均尺寸在生成（chéng）时（shí）保持不变 [约 110μm (0.7nL)] 。此（cǐ）外，液滴（dī）种（zhǒng）群仍（réng）然是单分散的。 根据统计（jì）分（fèn）析，计算出在加热循（xún）环后，只有（yǒu） 5% 的（de）整体液滴的（de）大小与平均初始液滴直（zhí）径的差异超过 10%。

将氟化油（yóu）从 Novec™ HFE 7500 切换到（dào） Fluo-Oil™ 135 对液（yè）滴（dī）稳定性（xìng）没有影响。

三、液滴（dī）内的分子（zǐ）滞留

基于液滴的化（huà）学或生（shēng）化分析依赖于（yú）试（shì）剂在单个液滴中保持隔离。 泄漏到连续相和液滴之间的交换，即使很低（dī），也会（huì）影（yǐng）响结果（guǒ）的完整性，因此，分（fèn）子保留是选择氟化（huà）油时要考虑的（de）重要参数。 众所周知，氟化油会限制（zhì）液滴之间的分（fèn）子交换，因此应验证（zhèng）切换油的影响。

同（tóng）时生成两种油包水（shuǐ）乳（rǔ）液[“空”（负载 PBS）和“满”（负载荧光素）液滴]，一（yī）次使用（yòng） Novec™ HFE7500，然后（hòu）使（shǐ）用 Fluo-Oil™ 135 作为连续相。 两种混合物，每一种（zhǒng）都包含两个种群，在 37°C 下孵育（yù），并在（zài）不同的时间（jiān）点拍摄（shè）照片。 使用 ImageJ 软件（jiàn）对液（yè）滴内荧（yíng）光强度的演变进（jìn）行了统计（jì）定量分析（xī）。

上图（tú）显（xiǎn）示了（le）两个群体之间平均荧光强度差异的演变（biàn）（染料加载和空液滴）以及在初始（shǐ）时间（jiān）点（diǎn）和（hé） 48 小（xiǎo）时后相（xiàng）关的荧光和明场图片。

在 24 小时的过程中，两种氟化油产生的液滴中荧光素的泄漏（lòu）率相（xiàng）似（约（yuē） 15% 泄漏），并且（qiě）在 Fluo-Oil™ 135 中产生液滴的（de）情（qíng）况下保持恒定 3 天。相反，在 24 小（xiǎo）时（shí）后（hòu）， Novec™ HFE7500 中液滴的泄漏继续减少并达到 30% 左右。 这种较长孵育时间（jiān）的较差（chà）保留性能可归（guī）因（yīn）于（yú）后一种油的粘度略低（dī），加速（sù）了（le）液滴之（zhī）间更快的分子交换。

结论

对于基于（yú）液滴的微流体应用，从一种氟化油类型（xíng）切（qiē）换到另一（yī）种类型可能会（huì）对微流体实（shí）验（yàn）的过程产生重大（dà）影响，尤其（qí）是对液滴的有效生成产生重（chóng）大影响。 在氟油3M Novec™ HFE7500电子氟化液 和 氟油Fluo-Oil™ 135 的（de）情况下，已证实更换这两种氟化油对实验条件和结（jié）果没有（yǒu）影响。 当（dāng）使用 Fluo-Oil™ 135 作为连续相时（shí），甚至可以观察到荧光素在液（yè）滴内的更好保留（liú）。

氟化油Fluo-Oil™ 135 是用于液滴微流体应用的3M Novec™ HFE7500 氟（fú）油 的有效（xiào）替代品。